Mueller Hinton Agar foi testado de acordo com o protocolo M6 atual publicado pelo NCCLS e atende aos limites de aceitação. É recomendado para teste de susceptibilidade antimicrobiano por disco de difusão comum em bactérias de crescimento rápido pelo método Bauer-Kirby, conforme padronizado pelo Comitê Nacional para Padrões de Laboratórios Clínicos (NCCLS - sigla em inglês). O meio é fabricado para conter baixos níveis de timina e timidina, e níveis controlados de cálcio e magnésio. A Timina e os níveis de timidina das matérias-primas são determinados usando o procedimento com o disco de difusão com sulfametoxazol-trimetoprima (SXT) e Enterococcus faecalis ATCC ™ 33186 e / ou 29212. Os níveis de cálcio e magnésio são controlados testando a matéria-prima e suplementando com fontes de cálcio e / ou magnésio, conforme necessário para produzir a zona correta de diâmetros com antibióticos aminoglicosídeos e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.